Pichia 是一个分泌主力。许多目标蛋白本就不该留在细胞内——它们需要被引导进入分泌途径。Kairos 现在能设计分泌构建体，不只是胞内编码序列：它选择信号肽、融合到目标上、并设计整个构建体的 CDS。
一条被选定的、可溯源的前导肽
对于分泌蛋白，Kairos 选择一条可溯源的分泌前导肽。每条候选前导肽都带其 UniProt 记录与支持文献。Kairos 目前工作的两条前导肽：
- S. cerevisiae α-交配因子 prepro 肽（UniProt
P01149）——Pichia 表达中最广泛使用的分泌信号。 - SUC2 转化酶信号肽（UniProt
P00724）——一条特征清晰的替代前导肽。
每一条都是真实的、可引用的生物零件——不是生成的序列。Kairos 的工作是恰当地选择并正确融合。
构造即正确
设计步骤把选定的前导肽 N 端融合到目标上，然后设计整个构建体的编码序列。结果经过验证：该设计精确编码 信号 + 目标，读码框内，前导肽处于其天然读码框中。这个保证是机械的，不是概率的——你可以在已打印序列上重新运行这个检查。
能做什么，不能做什么
Kairos 选择可溯源的前导肽并产出合法构建体。它不预测分泌效率——那取决于折叠、糖基化、宿主菌株与培养条件，有赖湿实验数据。设计依据为此反馈保留了接口。
参考文献
- UniProt P01149 — S. cerevisiae α-交配因子 prepro。 UniProt:P01149
- UniProt P00724 — SUC2 转化酶信号肽。 UniProt:P00724
- Merkaš M, et al. The MFα signal sequence in yeast-based protein secretion: challenges and innovations. Appl Microbiol Biotechnol, 2025. PMID:40471355
- Aw R, et al. A systematic analysis of the expression of the anti-HIV VRC01 antibody in Pichia pastoris through signal peptide optimization. Protein Expr Purif, 2018. PMID:29601964
- Bhakta V, et al. Expression and purification of a broad-spectrum human protease inhibitor in Pichia pastoris. Biochem Biophys Rep, 2025. PMID:40607491
范围。 Kairos 设计分泌构建体的编码序列，选择可溯源的信号肽并保证合法融合。分泌效率是湿实验，不预测。四个评分维度（可制造性、宿主相似性、5′ 起始、蛋白可开发性）仍然适用于该构建体。
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